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GPC的應用之植物油中9種抗氧化劑的測定分享

更新時間:2022-09-05 點擊次數:1211


實驗室配置了GPC,有什么用呢?


樣品的性質不同,對應的分離原理不同,如果前處理過程中增加GPC,等于增加了分離或凈化的過程。

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在對各類食品、農產品、水產品和中藥材中的農殘、半揮發性有機物分析時,樣品中一般會含有大分子物質(如色素、油脂等),如果不去除這些物質,會影響最終的分析結果及色譜柱的使用壽命。


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針對此問題,在農殘、半揮發性有機物的樣品分析前,必須進行有效的凈化前處理。如果實驗室中有GPC那就事半功倍了。接下來我們不妨了解一下GPC在液相中的應用。

GPC的分離原理

……

一種含有不同分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時,各分子在柱內同時進行著兩種不同的運動:垂直向下運動和無定向的擴散運動。

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大分子物質由于直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。

圖片

小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外,還可以進入凝膠顆粒的微孔中,即進入凝膠相內,在向下移動的過程中,從一個凝膠內擴散到顆粒間隙后再進入另一凝膠顆粒,如此不斷地進入和擴散,小分子物質的下移速度落后于大分子物質,從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出。

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樣品洗脫圖

GPC的作用

……

● 凈化樣品,去除樣品中的大分子基質或者小分子干擾物質,凈化后適合采用GC,HPLC,GCMS等儀器的分析,例如食用油中抗氧化劑、多環芳烴等的測試,須通過凝膠凈化前處理方式去除油脂等干擾物,將待分析物和干擾物分離開。

 保護分析儀器及色譜柱,防止大分子物質堵塞后續分析用色譜柱及儀器。

GPC的應用案例

……

植物油中9種抗氧化劑的測定(凝膠滲透色譜法)。

01

適用范圍

食品中PG、THBP、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、DG和BHT等九種抗氧化劑的測定。

參考標準:《GB 5009.32-2016 食品安全國家標準 食品中9種抗氧化劑的測定》。

02

原理

油脂樣品經有機溶劑溶解后,使用凝膠滲透色譜(GPC)凈化。

03

標準溶液的配置

分別稱取沒食子酸丙酯(PG),叔丁基對苯二酚(TBHQ),去甲二氫愈木創酸(NDGA),叔丁基對羧基茴香醚(BHA),2, 6-二叔丁基-4-羧甲ji苯酚(lonox-100),沒食子酸辛酯(OG),2, 6-二叔丁基對甲ji苯酚(BHT),沒食子酸十二酯(DG)10mg,用乙腈溶解并定容到10mL,得1000μg/mL的單標。

稱取2, 4, 5-三羧基苯丁酮(THBP)1mg,用乙腈溶解并定容到10mL,得單標100μg/mL。

流動相配制:1L環己烷和1L乙酸乙酯等比例混勻。

04

提取步驟

精確稱取取1g油樣于10mL容量瓶中,以流動相定容至刻度,待凈化。

加標過程:精確稱取取1g油樣于10mL容量瓶中,精確加入0.2mL100μg/mL9種抗氧化劑混標,以流動相定容至刻度,得加標量為20mg/kg,上機濃度為5μg/mL。

05

凝膠色譜凈化條件

GPC譜圖

儀器型號:月旭科技GPC1600凝膠色譜儀。

色譜柱型號:月旭Bio-Beads S-X3凝膠色譜柱,400mm×25mm;

流動相:乙酸乙酯-環己烷(1:1);

流速:5.0mL/min;

進樣量:5.0mL;

收集時間:14-25min;

波長:254nm。

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06

液相色譜分析條件

色譜柱:月旭Ultimate® XB-C18,5μm,4.6×250mm。

流動相:A:0.5%甲酸水溶液;B:甲醇;

流速:1mL/min;

進樣量:5μL;

柱溫:35℃;

檢測波長:280nm;

梯度洗脫表:見表1。

表1 梯度洗脫表

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07

液相色譜圖和加標回收率結果



結果展示

GPC-1600凝膠色譜儀加標回收率匯總表


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我們可以看到使用月旭凝膠柱對植物油中9種抗氧化劑凈化提取,回收率80-101%,結果滿足要求。


產品信息

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