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質(zhì)譜測(cè)定有機(jī)酸拖尾?可能是這個(gè)原因!

更新時(shí)間:2022-10-21 點(diǎn)擊次數(shù):2330


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有機(jī)酸的性質(zhì)


有機(jī)酸是指一些有酸性的有機(jī)化合物。最常見(jiàn)的有機(jī)酸是羧酸,其酸性源于羧基(-COOH)。磺酸(-SO3H)、亞磺酸(RSOOH)、硫羧酸(RCOSH)等也屬于有機(jī)酸。有機(jī)酸多溶于水或乙醇,難溶于其他有機(jī)溶劑。


2

拖尾原因

部分有機(jī)酸在C18柱上的保留和分離能力非常的弱,因此需要使用離子作用力對(duì)化合物進(jìn)行分離,但是液相質(zhì)譜的流動(dòng)相體系中因無(wú)法加入不揮發(fā)性鹽,且揮發(fā)性離子對(duì)試劑(如三氟yi酸等)也會(huì)降低質(zhì)譜響應(yīng),無(wú)法達(dá)到定量限要求,所以?xún)尚噪x子柱HILIC-Amphion II就成為了很好的選擇。

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但是在測(cè)試中發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的拖尾現(xiàn)象,調(diào)解pH后依然非常嚴(yán)重,通過(guò)取下色譜柱改用兩通后發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物4(L-谷氨酸)與其他目標(biāo)物比多了些保留時(shí)間,且拖尾依然嚴(yán)重,推斷液相體系可能污染(之前測(cè)試項(xiàng)目流動(dòng)相體系中含有三氟yi酸,可能發(fā)生殘留),導(dǎo)致了嚴(yán)重的拖尾。

微信截圖_20221021102111.png

3

解決方案

步驟1

取下色譜柱,換上兩通;

步驟2

取下所有流動(dòng)相瓶,更換為0.1%甲酸水溶液,以0.3mL/min流速?zèng)_洗2h;

步驟3

將0.1%甲酸水溶液更換為0.1%氨水溶液,以0.3mL/min流速?zèng)_洗2h;

步驟4

將0.1%氨水溶液更換為水溶液,以0.3mL/min流速?zèng)_洗2h;

步驟5

將水溶液更換為甲醇溶液,以0.3mL/min清洗2h。

注:清洗期間,液相不連接質(zhì)譜;如果液相體系中還存在其他污染源且按上述清洗效果依然不滿(mǎn)意的情況,可在甲醇清洗后用異丙醇進(jìn)行沖洗,再用甲醇更換體系中的異丙醇溶液。

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討論:多數(shù)情況下,當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)峰拖尾時(shí),考慮的更多的是液相方法或者色譜柱的問(wèn)題,很少會(huì)去排除液相系統(tǒng)中的污染問(wèn)題,希望這個(gè)案例能給大家在遇到峰拖尾又排查不出原因時(shí),提供一個(gè)思路。



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