液相色譜水相中常用的改性劑，你了解多少？

更新時間：2023-06-30 點擊次數：2411

在反相色譜中，流動相的選擇原則是：

關注我們

非極性/中性化合物分析一般用有機溶劑和水。極性（特別是離子型）化合物分析時，通常需要在水中加入酸/堿或者緩沖鹽來調整流動相pH值以獲得對稱的峰形和合理的保留時間。

向流動相中加入改性劑主要有以下兩種方式：

關注我們

01 氫離子抑制法

● 對于弱酸（3≤pk_a≤7）/弱堿（7≤pk_a≤8）組分，一般通過調節流動相的pH來抑制目標化合物的解離，以達到分離目的。弱酸的反相色譜保留值隨流動相pH值的減小而增大，當pH值遠小于弱酸的pk_a值（pH＜pk_a-2）時，弱酸99%以上以分子形式存在，有利于在反相色譜柱上保留。

● 對于弱堿，情況相反（須pH＞pk_a+2）。因此分析弱酸樣品時，通常在流動相中加入少量酸性緩沖液，如三氟yi酸等（實例見圖1）；分析弱堿樣品時，則加入少量堿性緩沖液，如三乙胺等。

● 下表列出幾種常見緩沖鹽的pH值可用范圍。一般緩沖鹽濃度在5-50mmol/L范圍就夠用，濃度高的緩沖鹽（＞50mmol/L）雖然緩沖能力增強，但可能在與高比例有機相混合時析出，對液相色譜輸液泵等產生不利影響。

微信截圖_20230630094720.png

微信截圖_20230630095018.png

1-草酸；2-酒石酸；3-奎寧酸；4-甲酸；

5-丙酮酸；6-蘋果酸；7-抗壞血酸；8-乳酸；

9-乙酸；10-馬來酸；11-檸檬酸；12-富馬酸；

13-順烏頭酸；14-丙烯酸；15-丙酸；16-檸康酸

02 離子對色譜法

● 對于強酸/堿及其他離子型化合物，需要在水中加入相應的“對/反離子"，使其與待測組分離子結合生成弱極性的離子對化合物（中性締合物），以增加其在反相色譜柱（如C₁₈、C₈）上的保留，從而改善分離效果。

● 離子對試劑一般可分為酸性和堿性兩大類：

1）分析堿性物質常用的離子對試劑為烷基磺酸鹽（實例見圖2），如己烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、十二烷基磺酸鈉等。

2）分離多羧基、磺酸基等酸性物質常用四丁基季銨鹽，如四丁基溴化銨、四丁基氯化銨等。被測組分保留時間與離子對性質、濃度、流動相組成及其pH值等都有關。

微信截圖_20230630095148.png

中文字幕一区二区三区精华液丨狠狠色噜噜狠狠狠狠色综合网丨日本熟妇人妻中出丨亚洲综合欧美色五月俺也去丨中国白嫩丰满人妻videos